PCR基因擴增法在“Torsch”診斷中的應用

在妊娠早期（1-3個月），有些病原微生物的感染易導致胎兒畸形，這些病原體中zui常見的有弓體、風疹病毒、單純皰疹病毒、沙眼衣原體、及巨細胞，對這幾種病原體的檢測根據其英文詞首簡稱為Torsch試驗。
 
（一）、弓形體的PCR檢測，弓形體有廣泛的自然疫原性，人體多為隱性感染，抵抗力低時可以有臨床表現。弓形體的診斷較困難，血清學方法敏感性較高但有交叉性出現假陽性而且無法確定近期感染、遠期感染或一過性感染。確診的方法是活組織檢查或動物接各，這些方法陽性率太低不能推廣。PCR檢測可以檢出樣本中1-2個病原體而且準確性高，是目前對弓形體檢測zui的方法。作為優(yōu)生優(yōu)育檢查應于妊娠前或妊娠早期取全血樣本，可以用EDTA或肝素抗凝，以EDTA抗凝效果，檢測外周血白細胞中是否有TOX存在。對于不孕，多次自然流產或養(yǎng)小動物的產期婦女，作弓形蟲檢測有更重要的臨床意義。 

（二）、單純皰診病毒，單純皰疹病毒（herpes simplex virus,HSV）是一種DNA病毒，可引起多器官的炎癥，可通過性接觸傳播。HSVⅡ感染復發(fā)率高，80%的感染者于12個月內復發(fā)。HSV感染后經機體免疫系統(tǒng)清除，少數病人終生攜帶，體弱時復發(fā)。PCR法檢測HSV敏感性高而且可以直接對HSVⅠ/Ⅱ型進行分型鑒定。

（三）、風疹病毒感染：風疹病毒（RV）是一種單股正極性RNA病毒，人是風診病毒的*宿主。RV感染可以引起胎兒的畸形，影響胎兒免疫系統(tǒng)的發(fā)育，因此RV檢測在優(yōu)生優(yōu)育工作中顯得非常重要。RV檢測可以用直接培養(yǎng)法及IgM抗體測試法。培養(yǎng)法費時很長而且常受到其它病毒的干擾，IgM測定法結果了不太準確，PCR法敏感性及特異性都很高而且簡便快速，是RV感染zui的測試方法之一。風疹病毒侵入體內后在上呼吸道增殖而出現癥狀，面部出現丘疹，迅速遍及全身。樣本采用妊娠母親的咽部拭子、血清、產婦的絨毛或妊娠如羊水等。RV病毒是RNA病毒，PCR擴增較復雜，應注意樣本的采集時機，操作的準確性。

（四）、人巨細胞（HCMV），HCMV感染十分普遍，除少數原發(fā)性感染發(fā)生原發(fā)性單核細胞增多癥外，很大多數為隱性感染。HCMV可以長期潛伏在體內，當機體免疫功能低下時，病毒會激活而造成嚴重疾病在妊娠期如果孕婦感染HCMV可以引起早產、畸型、死胎及新生兒巨細胞包涵體病等。HCMV屬皰疹病毒科，可以從唾液、尿、宮頸分泌物及乳汁排出。HCMV“金標準”的診斷試驗是用單層成纖維細胞作病毒培養(yǎng)，其它的實驗檢查有血清學的檢測及包涵體檢測。PCR是HCMV檢測的一種新方法，用于檢測的樣本有血，生殖道分泌物拭子等，用于優(yōu)生優(yōu)育檢測時應取血樣本。對于早期妊娠病人若有HCMV感染應再檢測羊水，或其它妊娠物，對病人認真及進跟蹤檢查，綜合判斷并采取相應的醫(yī)療措施。 

（五）、沙眼衣原體，沙眼衣原體（CT）不僅能引起沙眼而且能引起生死器感染，是一種性傳播性疾病。與淋?。∟G），梅毒等經典性傳播性疾病不同，CT易經其它接觸途徑傳播，少數地區(qū)對妊娠期婦女普查結果表明此人群中發(fā)病率高達20%-30%。在歐美等國家CT的感染已超過淋病而居性傳播性疾病。衣原體感染常呈無癥性或非特異性癥狀的隱性感染，不容易診斷。以往用培養(yǎng)法進行確診，費時且敏感性、準確性都不足。PCR用于CT檢測時應注意不同檢測目的的取材不同，對于性傳播性疾病診斷應取生殖道分泌物（查脫落細胞），而對于早期妊娠病人應查其全血樣本，在妊娠后期或臨產時再查陰道分泌物以便指導生育時產道清理。