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二、實(shí)驗(yàn)原理細(xì)胞死亡根據(jù)其性質(zhì)、起源及生物學(xué)意義區(qū)分為凋亡和壞死兩種不同類型。凋亡普遍存在于生命界，在生物個(gè)體和生存中起著非常重要的作用。它是細(xì)胞在一定生理?xiàng)l件下一系列順序發(fā)生事件的組合，是細(xì)胞遵循一定規(guī)律自己結(jié)束生命的自主控制過程。細(xì)胞凋亡具有可鑒別的形態(tài)學(xué)和生物化學(xué)特征。在形態(tài)上可見凋亡細(xì)胞與周圍細(xì)胞脫離接觸，細(xì)胞變園，細(xì)胞膜向內(nèi)皺縮、胞漿濃縮、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張、細(xì)胞核固縮破裂呈團(tuán)塊狀或新月狀分布、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和細(xì)胞膜進(jìn)一步融合將細(xì)胞分成多個(gè)完整包裹的凋亡小體，凋亡小體zui后被吞噬...

（一）原理混合單個(gè)核細(xì)胞懸液在通過尼龍毛柱時(shí)，B細(xì)胞、漿細(xì)胞、單核細(xì)胞和一些輔助細(xì)胞被選擇性粘附于尼龍毛上，而多數(shù)T細(xì)胞則通過尼龍毛柱，這是獲得富含T細(xì)胞群的有效方法。（二）材料及試劑1．尼龍毛（FemwallLaboratories,LP－1LeukoqakleukocyteFilters）。2．燒杯、鋁箔、漏斗、一次性手套等。3．裝填尼龍毛柱，一次性注射器。4．取自然沉降的上層血漿，過聚蔗糖—泛影葡胺分層液后，獲取的血漿和分層液之間的單個(gè)核細(xì)胞層。（三）操作方法1．尼龍毛...

一、形態(tài)學(xué)觀察方法1、HE染色、光鏡觀察：凋亡細(xì)胞呈圓形，胞核深染，胞質(zhì)濃縮，染色質(zhì)成團(tuán)塊狀，細(xì)胞表面有“出芽”現(xiàn)象。2、丫啶橙（AO）染色，熒光顯微鏡觀察：活細(xì)胞核呈黃綠色熒光，胞質(zhì)呈紅色熒光。凋亡細(xì)胞核染色質(zhì)呈黃綠色濃聚在核膜內(nèi)側(cè)，可見細(xì)胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。3、臺盼藍(lán)染色：如果細(xì)胞膜不完整、破裂，臺盼藍(lán)染料進(jìn)入細(xì)胞，細(xì)胞變藍(lán)，即為壞死。如果細(xì)胞膜完整，細(xì)胞不為臺盼藍(lán)染色，則為正常細(xì)胞或凋亡細(xì)胞。此方法對反映細(xì)胞膜的完整性，區(qū)別壞死細(xì)胞有一定的幫助。4、透射電鏡觀察：...

一、引言從1962年，Clark和Lyonszui先提出生物傳感器的設(shè)想距今已有40年。生物傳感器在發(fā)酵工藝、環(huán)境監(jiān)測、食品工程、臨床醫(yī)學(xué)、軍事及軍事醫(yī)學(xué)等方面得到了深度重視和廣泛應(yīng)用。在zui初15年里，生物傳感器主要是以研制酶電極制作的生物傳感器為主，但是由于酶的價(jià)格昂貴并不夠穩(wěn)定，因此以酶作為敏感材料的傳感器，其應(yīng)用受到一定的限制。近些年來，微生物固定化技術(shù)的不斷發(fā)展，產(chǎn)生了微生物電極。微生物電極以微生物活體作為分子識別元件，與酶電極相比有其獨(dú)到之處。它可以克服價(jià)格昂貴...

基本原理活細(xì)胞（密度較小）和死細(xì)胞（密度較大）密度不同，從而有助于將活的淋巴細(xì)胞和紅細(xì)胞分離。附加材料高密度溶液：Ficoll-Paque（Ficoll和泛影酸鈉；PharmaciaLKB）或Lympholyte-M（Cedarlane）12ml或50ml聚丙烯離心管（比聚苯乙烯離心管好）注：Ficoll-Paque和Lympholyte-M的密度與溫度有關(guān)；該方法中所采用的以及其他商品化的高密度溶液適合在室溫中使用。因此應(yīng)注意使細(xì)胞懸液、離心和高密度溶液控制在室溫。否則會(huì)因...

（一）濃縮膠濃縮法濃縮膠是一種高分子網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的有機(jī)聚合物，具有很強(qiáng)的吸水性能。每克干膠可吸水120ml～150ml。它能吸收低分子量的物質(zhì)，如水、葡萄糖、蔗糖、無機(jī)鹽等，適宜濃縮10000分子量以上的生物大分子物質(zhì)。濃縮后，蛋白質(zhì)的回收率可達(dá)80％～90％。比濃縮膠應(yīng)用方便，直接加入被濃縮的溶液中即可。必須注意，濃縮溶液的pH值應(yīng)大于被濃縮物質(zhì)的等電點(diǎn)，否則在濃縮膠表面產(chǎn)生陽離子交換，影響濃縮物質(zhì)的回收率。（二）冷凍干燥濃縮法這是濃縮蛋白質(zhì)的一種較好的辦法，它既使蛋白質(zhì)不易變...