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液相色譜在中藥研究中的應用進展
2010-7-21
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液相色譜分析是指流動相為液體的色譜技術,是色譜法中zui古老的一種,但通過改進填料的粒度及柱壓,在經典的液相柱色譜的基礎上引入了氣相色譜的塔板理論,在技術上采用了高壓輸液泵,固定相和高靈敏度的檢測器,實現了分析速度快、分離效率高和操作自動化,這種色譜技術被稱為液相色譜法(HighperformanceliquidchromatographyHPLC)。中藥的成分非常復雜,以往常用的薄層色譜等方法因其精密度、準確度、靈敏度、重現性差而不能滿足現代中藥的需要。液相色譜正是以其穩定...
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實驗動物細菌學監測標準操作規程
2010-7-20
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主體內容:1.標本的采集正常動物細菌檢測主要檢查呼吸道和腸道,分別取氣管分泌物及腸內容物做細菌培養檢查。對于發病動物,采取其病變組織和臟器做細菌學檢查。2.細菌的培養細菌是單細胞的原核生物,絕大部分都可以在人工培養基上進行繁殖,只有少數例外,如泰澤病原體需在活細胞中繁殖。不同細菌種類所要求的zui適生長條件不盡相同,有些細菌需在有氧的環境下才能生長,稱為需氧菌;有些只能在無氧環境下生長,稱為厭氧菌;還有一些細菌在有氧、無氧環境下都可以生長,稱為兼性厭氧菌。培養細菌的目的,是從...
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淺談RT-PCR實驗方法中常見污染問題及對策
2010-7-19
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李軻反轉錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)是一種體外核酸擴增技術,它具有特異、敏感、快速、簡便、重復性好、易自動化等突出優點,能在幾個小時內完成從一根毛發、一滴血、甚至一個細胞中擴增出足量的目的產物供分析研究和檢測鑒定,所以近年來RT-PCR技術被廣泛應用于人和動物的多種傳染病早期診斷。筆者一直從事實驗室動物疫病檢測工作,現就應用RT-PCR實驗方法過程中出現的一些常見污染問題做如下論述,僅共同行參考和探討。RT-PCR實驗有三步:提取RNA、反轉錄(RT)、PCR擴增及擴增產...
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小鼠脾臟樹突細胞的分離-膠原酶消化制備脾臟細胞懸液
2010-7-16
2927
輔助方案:膠原酶消化制備脾臟細胞懸液實驗材料:1.4000U/ml膠原酶D,融化后置于冰上2.HBSS,已滅菌,含Ca+、Mg2+(購置于LifeTechnologies)3.小鼠脾臟4.皮下注射針,22G×11/2in內徑(BectonDickinson)5.10ml、5ml一次性注射器(如BectonDickinson)6.100mm直徑培養皿(如Falcon)7.2個高壓滅菌鍋的鋸齒狀解剖鑷(如Roboz)8.高壓滅菌的不銹鋼網:將40目的不銹鋼網剪成5cm×5cm的小...
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細胞分化與腫瘤
2010-7-13
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腫瘤是細胞在各種致瘤因素的作用下,基因發生改變,失去對其生長的正常調控,導致細胞異常增生。惡性腫瘤又稱為癌癥(cancer),是目前危害人類健康zui嚴重的一類疾病。我國城市地區居民死因*位為惡性腫瘤。腫瘤細胞在很多生物學特性上不同于正常細胞,也有別于修復性增生的細胞,具有明顯的去分化現象。一、腫瘤細胞的分化特征惡性腫瘤細胞的特征之一是分化程度低,表現為形態上的幼稚性,功能上的異常,細胞的多種表型(phenotype)又回到原始的胚胎細胞表型,即發生細胞的去分化現象。機體在致...
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細胞研究*的細胞體積分析
2010-7-6
1856
生物、藥物等許多的研究均需要通過觀察細胞體積的變化或細胞數目增減的來判斷和評估實驗的效果。由于細胞所處環境的改變可促使其自身體積做出相應的變化,以便適應改變后的環境大致新的平衡。由于并不能清晰地知道該種細胞體積變化規律,因此必須檢測其體積或細胞數目隨條件、時間的變化。細胞的發育與細胞分裂周期級數遞增均需要連續不斷的細胞增殖。在培養液中正在增殖的細胞在其分裂前其體積將增大至原體積的兩倍。然而對細胞發育與分裂的速度作如何調整才能保證細胞體積的不變并不明確。因此,測量細胞的體積的變...